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在这个方面方源应当是三尊中最为薄弱的了实验里常用的乙腈和甲醇在色谱分析中的区别2018-11-23 10:49·京典科技乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂所以除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题韩国漾林YL色谱分析仪器首先对流动相溶液的准备提出几点意见只有纯水溶液部分才能正确调整pH值不要尝试测量或调整有机或有机混合物的pH值制备二元混合物的方法有两种即V/V流动相溶液方法#1是用特定体积的A溶液填充一个量瓶然后用B溶液将量瓶填满方法#2是用指定数量的A溶液填充量筒(或容量瓶)；用指定数量的B溶液填充第二个量筒(或容量瓶)然后将两者的内容混合在一起无论您使用哪种方法请在您的高效液相色谱法中完整地记录它以便任何阅读它的人都能准确地复制它上面描述的两种方法在设计上都是正确的但是会产生不同性质的结果紫外线吸光度对于HPLC级溶剂(我们在HPLC分析中应始终使用HPLC级溶液)乙腈的吸光度在这两种溶剂中最低非常适合低紫外光分析甲醇在205-210nm左右有较高的紫外光吸收值在非常低的紫外光范围内略有限制溶剂溶解性乙腈和甲醇在溶解多种缓冲盐和样品的能力上存在显著差异这些差异在方法开发中至关重要1.流动相溶解度梯度运行显示低重现性或失败的一个常见原因可能与运行高浓度缓冲液和高浓度有机溶液有关而含有浓度小于10mM盐溶液的水溶液/有机溶液在大多数梯度条件下不太可能沉淀（最多98%是有机溶剂而不是100%)大多数与高效液相色谱应用一起使用的缓冲溶液会有更高的盐浓度当分析条件中有机溶剂含量较高时可能会从溶液中析出（导致堵塞泄漏插头和不准确的结果）在反向色谱法中选择有机组成时要谨慎确保使用的溶液在所有浓度下都是稳定的还要验证缓冲能力是否仍然存在当使用高有机浓度时(当缓冲液被稀释时)不确定盐是否会溶解?只要把同样浓度的溶剂混合起来做测试就行了观察它有任何浑浊或可见颗粒吗?你就可以得到你需要的答案甲醇总体上具有更好的溶解度特性(优于乙腈)这意味着它在较高浓度下能更好地溶解大多数盐从而获得更好的性能和更少的沉淀2.样品的溶解度(对峰形和保留的影响)液相色谱的一个基本要求是样品完全溶解在流动相(初始流动相)中在分析前将样品溶解在流动相或强度稍弱的溶液（不是更强的溶液）这确保它将作为一个集中的段塞加载到柱的顶部以改善峰形和RSD如果样品没有完全溶解在流动相那么你实际上并没有分析整个样品甲醇优于乙腈的另一个方面是它能完全溶解更多类型的样品这一改进的溶解度可能导致更好的整体峰形甲醇的选择性也不同于乙腈(不仅仅是洗脱强度)这可能导致峰洗脱时间与预期的保留时间不同这也是为什么在开发反向方法时我们总是尝试使用含有乙腈或甲醇的不同流动相混合物的另一个原因永远不要假设一种溶剂会比另一种溶剂更好太多的色谱新手只使用乙腈作为他们方法开发的主要有机溶剂请不要犯他们的错误这样的策略表明缺乏实践经验和知识您必须首先分别尝试它们（乙腈&甲醇）用你的样品来评估结果（在适用的情况下最好从不同pH值的全面梯度开始）如果您在最初的时间内测试了这两种类型的溶剂那么将获得回报因为还没有开发出能够使用您自己的样品来预测真正准确的结果的模拟器可能会惊讶地发现有多少样品使用甲醇溶液显示出更好的峰形和性能如果没有看到任何改善至少你现在知道了因为你已经尝试过了并且可以满怀信心地前进背压乙腈的粘性比甲醇小因此通常会导致整体柱压和系统背压降低乙腈和水的混合物也会发生吸热反应(冷却溶液)从而在溶液中捕获气体如果你预先混合你的流动相让它静置几分钟后在制备甲醇比乙腈更粘稠它还有一个不寻常的特性就是甲醇和水的50/50混合物会产生一个比甲醇或水更高的系统和柱背压它的峰值压力是由50/50的混合物所观察到的两种溶液在开始混合释放出一些气体也会产生放热反应在制备溶液时最好是让溶液静置几分钟然后在高压液相色谱系统中使用希望这篇关于这两种常用高效液相色谱溶剂的差异的简短讨论将有助于您开发出更好的高效液相色谱和LC-MS方法